细胞培养之细胞培养用品的清洗与清洗液配方

三.细胞培养用品的清洗与清洗液配方
(1)        清 洗
1.        常用玻璃器皿清洗
◇        清洗要领
        浸泡
        初次使用的玻璃器皿呈碱性，表面常附有灰尘和一些对细胞有毒的物质，如铝和砷等。空气湿度高时，玻璃器皿表面又易长霉。使用前，新器皿浸泡在5％稀盐酸中过夜，以中和玻璃表面的碱性物质并去除霉斑；然后经简单刷洗，流水冲洗(逐片进行)，蒸馏水浸泡，干燥备用。新玻片处理后，短时间不用时，需将它投入95％的酒精中保存，以防玻片长霉。培养后的玻璃器皿应立即投入清水中浸泡，器皿中残留的细胞、蛋白质一旦干涸，即固着于玻璃表面，极难脱落。
        刷洗
        用过的玻璃器材经自来水冲洗后，浸入水中煮沸，然后将适量洗涤剂(洗洁精或洗衣粉)投入沸水中继续煮沸10分钟，趁热刷洗器皿内外，刷洗后浸入清水中进行冲洗。
        酸泡
        刷洗好的玻璃器材干燥后置清洁液中浸泡24小时，清洁液的强氧化作用可清除刷洗不掉的极微量杂质。
◇        清洗步骤
        玻璃器材煮沸10分钟→刷洗→流水振荡冲洗15-20遍→50℃烤干→清洁液浸泡24小时→流水振荡后冲洗15-20遍→漓水→蒸馏水浸泡2次(每次24小时)→50℃烤干，待包装。
◇        清洗注意事项和要求
①        使用后的实验器材应立即投入清水中。
②        浸泡、煮沸、酸泡的器皿内要充满液体，不得有气泡。
③        刷洗、酸泡后的器材要用流水振荡冲洗，不得残留洗涤剂、清洁液。方法是：每瓶灌2／3容积
        的自来水，振荡后倒掉，重复15—20次(尖滴管置量杯中冲洗)。
④        煮沸前的水面要高于器材5厘米，水沸后投入洗涤剂(直径35厘米的铝锅，用洗衣粉10克左右)。
        若洗涤剂和实验器材同时从冷水煮至沸腾或使用过量洗剂，均易腐蚀玻璃表面，使玻璃碱化，
        pH值上升。
⑤        软毛刷的刷端已掉毛的应该弃去，否则会损害玻璃。玻璃划痕处易残留洗涤剂，会改变培养液
        pH值和毒害细胞。
⑥        清洁物品应及时包装消毒，应注意妥善保存，防止落入灰尘、蟑螂、蚂蚁等引起二次污染。
⑦        使用后的胶塞与玻璃器材同时煮洗时，胶塞要放在煮锅的底部。
⑧        浸泡器材的蒸馏水容器要专用，并做好标记，如“蒸馏水Ⅰ盆”、“蒸馏水Ⅱ盆”。
⑨        器材清洗干燥后，在以后各步操作时，手指不可接触器材的使用端。清洗者可戴一次性薄膜手
        套进行操作，省时又保证清洗质量。
⑩        用超声波仪清洗器材时，清洗要求同上。
       
2.        橡胶制品的清洗
        新购置的橡胶制品(胶塞、胶管、橡皮乳头)的洗涤方法如下：0．5摩尔/升NaOH煮沸15分钟→流水冲洗→0．5摩尔/升HCl煮沸15分钟→流水冲洗→自来水煮沸2次→蒸馏水煮沸20分钟→50℃烤干备用。这样处理可完全除净胶塞上的硫磺等有毒物质。用过的胶塞，其清洗方法、要求基本同玻璃器材。因胶塞使用面常沾有洗涤剂，流水冲不净，故胶塞洗刷的重点部位是胶塞使用面，用刷逐个刷洗。在使用过程中，胶塞不能与培养液接触，以防未洗净的胶塞污染培养液和细胞。
       
3．        G6除菌滤器的清洗
        新G6除菌滤器置玻璃洗液中浸泡24小时，流水缓慢冲洗，至pH值为5．5左右，然后用4倍的蒸馏水缓慢冲洗，再用重蒸馏水缓慢冲洗，烤干，包装消毒备用。用过的G6除菌漏斗立即浸泡水中(注意：滤器千万不能干涸)过夜，流水缓慢冲洗24小时或更长时间，至滤面基本疏通时，50℃烤干，滤器再置清洁液中浸泡24小时，或装满清洁液自然过滤。流水冲洗及其后的处理同新G6除菌滤器。
       
4.        正压除菌滤器的清洗
        新的或使用后的正压滤器经稀洗涤剂刷洗一流水冲洗15分钟→漓水→去离子水浸泡24小时→三蒸水浸泡24小时→干燥备用。
       
5.        塑料制品的清洗
        塑料制品质地软且耐腐蚀能力强，但不耐热，易出现划痕。其清洗程序为：器皿用后立即用流水冲洗→浸于自来水中过夜→用纱布、棉签和50℃稀洗液刷洗→流水冲洗(人工冲洗15—20遍)→晾干→浸于清洁液中15分钟→流水冲洗→蒸馏水浸泡两次(每次24小时)→晾干备用。
       
6.        清洗液的配制
        清洁液
        新配制的清洁液为棕红色，遇有机溶剂或水分增多时变成绿色，表明失效。
        先在搪瓷盆中加入蒸馏水，加热溶解重铬酸钾，再将盆置流 动自来水中，待重铬酸钾液冷却后，缓慢加入浓硫酸，边加边用玻棒搅动，以混合液温度不过快上升和不出现重铬酸钾结晶为度。
        玻璃滤器洗液
        取10克硝酸钠和28．6毫升浓硫酸，放入盛有470毫升蒸馏水的玻璃缸内混匀备用。
清洁液配方
配方成分        常用方        弱液        次强液        强液
重铬酸钾（g）        100        50        100        60
清水（ml）        800        1000        1000        200
浓硫酸（ml）        200        90        160        800
硫酸浓度（v/v）        20%        8%        14%        80%

互相学习，仅供参考！

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谢谢啦！！！