求助 DNA复制

在DNA复制时前导链的复制需要RNA引物吗

需要........

当然需要了,任何一种DNA聚合酶都需要有游离3`--OH才能在其基础上加入dNTP.而RNA聚合酶则不需游离3`--OH便可聚合NTP,因此不管是前导链还是滞后链都需要RNA聚合酶合成引物才能合成DNA,引物一般是几bp到几十bp

要的，可以尽量减少DNA复制起始处的突变

在DNA复制时前导链的复制当然需要RNA引物。

既然，问到了这题就多说点，目前国内的分子生物学教材和生物化学教材都叙述不详细或者干脆不说真核DNA复制过程。

我下面简述一下：
简要说明真核细胞中的DNA复制过程。
答：第一步，复制起始。ORC结合到DNA复制起点，随后与Cdc6和Cdt1引导Mcm2-7复合体（包括Mcm2- Mcm7共有6个亚基）着陆在染色质上，这时即形成了前复制复合体（Pre-RC）在G1期。紧接着，被结合到Pre-RC上的CDKs和DDK活化的前复制复合体（Pre-RC）容许Mcm10，RP-A和Cdc45着陆于染色质上。这时前复制复合体（Pre-RC）形成了前起始复合体（Pre-IC），同时也活化了复制的Mcm2-7的 DNA螺旋酶活性。
第二步，Polα/Primase在前导链与后随链上合成RNA引物和iDNA。在Polα/Primase结合到DNA复制起点之前，形成了所谓的connector功能体系：Mcm10，And-1/Ctf4(recuits Polα/Primase to chromatin)、Cdc45（connector to Polα/Primase and to GINS）和四亚基组成的蛋白质GINS(connector to MCM DNA helicase and Polα/Primase to chromatin) 。这个体系容许MCM DNA螺旋酶解旋DNA，进而吸引RP-A结合到前导链和后随链的单链DNA上（相当于原核生物的SSB）一边未定单链DNA。Mcm 2-7 DNA螺旋酶弯曲后随链并且通过水解ATP获得的能量溶解开DNA双链，在复制起点处。RP-A与Mcm 2-7的结合于DNA上与发挥作用在DNA复制的起始与延伸过程中皆存在。
第三步，DNA双链合成（延伸）。Polα/Primase能够合在前导链与后随链上以ssDNA为模板合成由30个核苷酸和脱氧核苷酸组成的RNA/DNA引物，之后被Polδ或/和Polε替代。略为详细的过程如下：随着RF-C结合到引物（primer）和PCNA着陆到染色质上，复制性质的DNA聚合酶（Polε和Polδ）即被招募到DNA上。这样的结果是DNA复制的延伸过程在DNA双链上都开始了：前导链是Polε全酶（PCNA，RF-C和Polε）进行持续的DNA合成，在后随链上，在Polα/Primase产生冈崎片段后，由Polδ全酶（PCNA，RF-C和Polδ）进行持续的DNA合成。在后随链延伸过程中，当Polδ遇到起始阶段合成的RNA/DNA引物时，由与PCNA相结合的Fen1 切除掉RNA/DNA引物，并且由Polδ合成一条新的DNA单链以取代原来的RNA/DNA引物，最后由DNA连接酶补上缺口。
    参考：Sonya Vengrova and Jacob Z.Dalgard edit,DNA Replication---Methods and Protocols(Methods in Molecular Biology Vol-521 ,Humana Press,2009,P21。